2013年  第40卷  第13期

基础研究
沉默SND1重组慢病毒制备及其对乳腺癌细胞增殖和侵袭的影响
于林, 邸研博, 杨洁
2013, 40(13): 749-753. doi: 10.3969/j.issn.1000-8179.2013.13.001
摘要:
  目的   探讨沉默葡萄球菌核酸酶结构域包含蛋白1(Staphylococcal nuclease domain containing 1,SND1)表达对乳腺癌细胞系MCF-7增殖和侵袭迁移的影响。   方法   制备可介导SND1靶向沉默的重组慢病毒,感染MCF-7细胞建立沉默SND1的稳定亚细胞系;用qRT-PCR和Western blot检测SND1沉默效果;用噻唑蓝(MTS)染色法、细胞划痕和transwell实验,检测沉默SND1后MCF-7细胞增殖及侵袭迁移能力的变化。   结果   成功构建了表达靶向SND1shRNA及对照shRNA的重组慢病毒质粒,经包装获得重组慢病毒(LV-SH1、LV-SH2、LV-SH3和LV-NC);用上述慢病毒感染MCF-7细胞,筛选出SND1沉默效果最佳的稳定亚细胞系MCF-SH3;增殖与侵袭迁移检测结果显示,MCF-SH3的增殖活性及侵袭迁移能力显著低于对照组细胞,差异有统计学意义(P < 0.01)。   结论   SND1可以促进乳腺癌细胞增殖及侵袭迁移,沉默SND1表达可抑制其增殖及侵袭迁移,提示SND1表达异常与乳腺癌密切相关,可能通过影响细胞增殖及侵袭迁移在乳腺癌的发生发展中起重要作用。
鼻咽癌肿瘤干细胞样细胞亚群的分离及初步鉴定
冀天星, 张鑫, 李祥勇, 李彩虹, 黄颖, 周克元, 李涛
2013, 40(13): 754-757. doi: 10.3969/j.issn.1000-8179.2013.13.002
摘要:
  目的   分离和鉴定具有肿瘤干细胞特性的鼻咽癌球形成细胞亚群。   方法   利用无血清干细胞球悬浮培养技术从不同分化程度鼻咽癌细胞株中分离成球细胞,然后利用MTT法,软琼脂克隆形成实验,分别评价成球细胞的耐药性、克隆形成能力,最后利用RT-PCR和免疫荧光细胞技术分析干性基因及Wnt信号通路关键转录因子β-catenin在成球及未成球细胞中的表达情况。   结果   低分化鼻咽癌细胞含有较高成球细胞,而高分化细胞株CNE-1中未见成球细胞。与CNE-2相比较,CNE-2S(来源于CNE-2的成球细胞)具有较强的抗肿瘤药物耐药性、克隆形成能力、高表达干性基因,且β-catenin在胞浆和核内都呈高表达。   结论   本研究分离到干细胞样鼻咽癌成球细胞亚群,为最终靶向杀灭鼻咽癌肿瘤干细胞提供了可能。
EGCG诱导人胃癌MGC-803细胞凋亡相关基因的差异表达
邹少娜, 林敏, 陈波, 罗招阳
2013, 40(13): 758-762. doi: 10.3969/j.issn.1000-8179.2013.13.003
摘要:
  目的   研究表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)诱导人胃癌MGC-803细胞凋亡的生物学效应,并探讨其分子机制。   方法   运用DNA含量分析、Annexin Ⅴ/PI双标记法、DNA琼脂糖凝胶电泳以及透射电子显微镜形态学方法来观察细胞凋亡。通过SuperArray人细胞凋亡基因芯片检测100μmol/L EGCG作用于MGC-803细胞12 h后凋亡相关基因的表达谱,采用RT-PCR和Western blot技术验证上调基因Fas-L和下调基因Bag-1。   结果   25、50、100、200 μmol/L EGCG作用于MGC-803细胞24 h后,DNA含量分析出现了明显的亚二倍体峰;100 μmol/L EGCG作用4、8、12、24 h后,Annexin Ⅴ/PI双标记法表明早期凋亡细胞显著增加。100 μmol/L EGCG作用24 h后,在琼脂糖凝胶上电泳可见DNA凋亡特征性的阶梯状条带。电子显微镜观察到细胞体积缩小,核浓缩和凋亡小体形成等典型的形态学改变。通过基因芯片检测发现,100 μmol/L EGCG作用12 h后有8个凋亡相关基因表达差异显著,选择其中Fas-L和Bag-1运用RT-PCR和Western blot技术进行验证,其结果与基因芯片一致。   结论   EGCG能够诱导人胃癌MGC-803细胞凋亡,这可能是多个基因和多条信号转导通路共同作用的结果。
临床研究
miR-150在套细胞淋巴瘤中的表达及意义
张新伟, 王芳, 任秀宝, TaoJianguo
2013, 40(13): 763-766. doi: 10.3969/j.issn.1000-8179.2013.13.004
摘要:
  目的   探讨套细胞淋巴瘤(mantle cell lymphoma,MCL)中miR-150的表达情况及其临床意义。   方法   通过定量RT-PCR检测29例初治MCL患者及7例正常人外周血B细胞中miR-150和c-Myc的表达水平,探索miR-150和c-Myc表达之间的关系;利用RNAi阻断MCL细胞系Mino和HBL-2中c-Myc表达后,检测miR-150的变化,确定c-Myc是否参与miR-150的表达调控;抑制P493-6细胞表达c-Myc后,观察miR-150的变化,进一步明确miR-150是否受c-Myc调节;将pre-miR-150电转HBL-2细胞系,通过集落形成试验明确miR-150对细胞增殖的影响,Western blot检测c-Myb蛋白的变化。   结果   与正常人外周血B细胞相比,MCL患者低表达miR-150、过表达c-Myc,两者的表达呈负相关;阻断c-Myc后,Mino和HBL-2细胞的miR-150表达增加;抑制c-Myc表达后,P493-6细胞的miR-150表达增高;过表达miR-150后,HBL-2的c-Myb蛋白表达水平和集落形成能力下降。   结论   MCL患者低表达miR-150的原因可能与其c-Myc过表达有关。miR-150能够抑制MCL的增殖,在MCL的治疗中具有潜在价值。
结直肠癌患者血清IL-17和TGF-β浓度及其相关性的初步研究
王梦洁, 孙苏平, 钱科卿, 闵海燕, 岑玲, 戚春建
2013, 40(13): 767-769, 778. doi: 10.3969/j.issn.1000-8179.2013.13.005
摘要:
  目的   研究血清IL-17和TGF-β浓度变化与结直肠癌(colorectal cancer,CRC)发生发展的相关性及其临床意义。   方法   健康志愿者30例、无远处转移并行手术治疗的结直肠癌患者59例及术后发生远处转移的44例患者被纳入本研究,依次为A(对照组)、B、C组,平均年龄分别为(53.8±20.8)岁、(62.0±11.8)岁、(64.0±15.7)岁,所有患者均经病理学检查确诊为结肠或直肠癌。B组59例,其中结肠癌26例为B1组,直肠癌33例为B2组;C组44例,其中结肠癌23例为C1组;直肠癌21例为C2组。测定A、B和C组血清IL-17和TGF-β浓度,其中分别测定B组术前术后血清IL-17和TGF-β浓度。   结果   血清IL-17浓度测定结果显示,B组术前高于术后,C组高于B组(术前和术后),B、C组均高于A组,B组术前术后比较、B组和C组比较及B、C组与对照组比较差异均有统计学意义(P < 0.05)。B组术前、术后血清TGF-β水平比较差异无统计学意义(P>0.05),A组和B组比较差异无统计学意义(P>0.05)。C组高于B组,B、C组均高于A组,C组和B组比较,B、C组和A组比较,差异均有统计学意义(P < 0.05)。B组结肠癌(B1组)和直肠癌(B2组)组比较、C组结肠癌(C1)和直肠癌(C2)组比较,血清IL-17和TGF-β水平差异均无统计学意义(P>0.05)。   结论   血清IL-17水平和结直肠癌的发生、发展密切相关,随着结直肠癌进展和肿瘤负荷增加,血清IL-17水平升高。血清TGF-β水平和结直肠癌转移显著相关,在结直肠癌的转移机制中可能起到重要作用。
肝癌中Tiam-1和HPA-1的表达及其与侵袭转移的关系
王贺, 孙风波, 张凤娟, 亓玉琴
2013, 40(13): 770-774. doi: 10.3969/j.issn.1000-8179.2013.13.006
摘要:
  目的   探讨Tiam-1和HPA-1基因在肝癌中的定量表达及其与肝癌侵袭转移的关系。   方法   选取2009年5月至2012年1月行手术治疗的肝癌患者65例。采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测Tiam-1 mRNA及HPA-1 mRNA在原发性肝细胞肝癌、配对癌旁组织(距癌2 cm)及正常肝脏组织中(距癌>5 cm)的表达水平,并分析两者与肝癌临床病理参数的关系。   结果   肝癌组织中Tiam-1 mRNA的表达水平(43.83±11.62)显著高于癌旁组织(14.82±8.16)和正常肝脏组织(6.02± 5.36)(均P < 0.05),癌旁组织中Tiam-1 mRNA的表达水平高于正常肝脏组织(P < 0.05)。肝癌组织中HPA-1 mRNA的表达水平(35.28±11.81)显著高于癌旁组织(12.94±6.25)和正常肝脏组织(4.17±3.49)(均P < 0.05),癌旁组织中HPA-1 mRNA的表达水平高于正常肝脏组织(P < 0.05)。Tiam-1及HPA-1的表达增强与肿瘤的分化程度、浸润深度、淋巴结转移、血行转移及TNM分期显著相关(均P < 0.05)。Spearman等级相关分析证明了Tiam-1和HPA-1的表达呈明显正相关(OR=0.523,P < 0.05)。   结论   Tiam-1 mRNA和HPA-1 mRNA在肝癌组织中呈高表达,且两者的表达增强可促进肝癌的侵袭转移。联合检测Tiam-1及HPA-1对于指导肝癌临床治疗及判断预后有重要价值。
口腔鳞癌中心体扩增与p53 STK15蛋白表达相关性
卢虹, 杨宏, 蔡扬
2013, 40(13): 775-778. doi: 10.3969/j.issn.1000-8179.2013.13.007
摘要:
  目的  分析STK15及p53蛋白表达与口腔鳞状细胞癌(OSCC)中心体扩增相关性,探讨OSCC中心体扩增可能分子调控机制。  方法  8例正常口腔黏膜及43例OSCC石蜡包埋组织,采用间接免疫荧光双重染色了解OSCC中心体数目扩增状况,采用免疫组织化学方法检测相应组织p53、STK15蛋白表达情况,并分析其与中心体扩增相关性。  结果  中心体扩增可见于76.74%(33/43)OSCC中。OSCC中STK15阳性率为67.44%(29/43),STK15阳性率在p53阳性组高于p53阴性组(P < 0.05)。OSCC中心体扩增发生率在STK15/p53阳性共表达组高于STK15/ p53阴性组(P < 0.05),Spearman相关分析显示STK15/ p53阳性共表达与OSCC中心体扩增之间存在相关关系(r=0.356,P=0.019)。  结论  中心体扩增是OSCC常见异常现象,p53/STK15转激活-非依赖通路可能参与中心体异常的形成,与之共同参与OSCC的发生。
临床应用
适形放疗联合托泊替康化疗治疗铂类耐药的复发卵巢癌临床观察
魏萍, 盛修贵, 山长平, 韩晓运
2013, 40(13): 779-783. doi: 10.3969/j.issn.1000-8179.2013.13.008
摘要:
  目的   观察三维适形放疗联合托泊替康化疗治疗铂类耐药复发卵巢上皮癌的疗效及不良反应。   方法   回顾性分析2008年6月至2011年6月山东省肿瘤医院收治的铂类耐药复发卵巢上皮癌患者42例,其中三维适形放疗联合托泊替康化疗22例(放化疗组),单药托泊替康化疗20例(单纯化疗组)。放化疗组以15MV X线行三维适形照射,1.8~2.0 Gy/次/d,5次/周,总剂量45~65Gy,平均中位剂量为52.5 Gy。于放疗开始后第1周行托泊替康化疗2.0 mg/m2,第1、8、15天给药,每28天重复。单纯化疗组于第1周开始行托泊替康化疗4.0 mg/m2,第1、8、15天给药,每28天重复。   结果   放化疗组、单纯化疗组中位随访时间分别为18.5(2~37.7)个月、10.8(1.5~29.6)个月;总缓解率分别为42.1%(8/19)、11.1%(2/18);临床获益率分别为68.4%(13/19)、22.2%(4/18),两组比较有显著性差异(P < 0.05)。中位疾病无进展期分别为9.8、6.6个月,两组比较有显著性差异(P < 0.001)。中位生存期分别为19.7、12.5个月,两组比较有显著性差异(P < 0.05)。Ⅲ度消化道反应发生率分别为26.3%(5/19)、16.7%(3/18);Ⅲ~Ⅳ级血液学毒性发生率分别为21.1%(4/19)、22.2%(4/18),两组比较无显著性差异(P>0.05)。   结论   三维适形放疗联合托泊替康化疗对铂类耐药复发卵巢上皮癌有较好的疗效,且不良反应轻微,可作为复发患者的补救治疗措施。
金龙胶囊联合三维适形放疗治疗原发性肝癌
汪宏斌, 杨俊泉
2013, 40(13): 784-787. doi: 10.3969/j.issn.1000-8179.2013.13.009
摘要:
  目的   探讨金龙胶囊联合三维适形放疗治疗原发性肝癌的疗效和不良反应。   方法   85例不能手术的原发性肝癌分成三维适形放疗联合金龙胶囊治疗组(研究组)和单纯三维适形放疗组(对照组)。所有病例均采用6MVX线三维适形放疗, 每天1次, 每次2 Gy, 每周照射5次, 共计6周, 总量60 Gy。42例对照组仅接受三维适形放疗, 研究组43例接受三维适形放疗同时金龙口服胶囊, 每次1 g, 每日3次, 直至病变进展或至少1年。治疗结束后2个月评价近期疗效和不良反应, 随访结束后评价远期疗效。   结果   研究组客观有效率74.4%(32/43)明显高于对照组47.6%(20/42, P=0.011);研究组疾病控制率97.7%(42/43)高于对照组83.3%(35/42, P=0.030);两组CR率20.9%(9/43)和14.3%(6/42)无显著性差异, P=0.422。研究组1年、3年总生存率74.4%(32/43)和34.9%(15/43)高于对照组66.7%(28/42)和16.7%(7/42, P=0.046)。研究组1年、3年无进展生存率74.4%(32/43)和27.9%(12/43)明显高于对照组61.9%(26/42)和9.5%(4/42, P=0.034)。主要不良反应为1~2度骨髓抑制, 腹胀恶心呕吐, 转氨酶升高, 两组无显著性差异。   结论   三维适形放疗联合金龙胶囊治疗原发性肝癌优于单纯适形放疗, 不良反应可以耐受。
多西他赛联合奥沙利铂及替吉奥治疗进展期胃癌的疗效及对围手术期影响
刘林, 杨新辉, 王海江, 尹东, 王琦三, 雷程, 金博
2013, 40(13): 788-791. doi: 10.3969/j.issn.1000-8179.2013.13.010
摘要:
  目的   观察多西他赛+奥沙利铂+替吉奥(DOS方案)治疗进展期胃癌疗效及对手术安全性的评估。   方法   应用前瞻性随机对照的方法分析新疆医科大学附属肿瘤医院胃肠外科自2011年1月至2012年5月50例符合入组条件的进展期胃癌患者。按入组顺序根据随机数字表法分为观察组(25例)和对照组(25例)。25例患者术前予以DOS方案化疗(观察组), 3个周期化疗后行手术治疗, 25例行单纯手术治疗(对照组)。   结果   观察组DOS方案新辅助化疗的临床有效率为64.0%, D2淋巴结清扫率(88.0%vs.64.0%)及R0切除率(92.0%vs.68.0%)明显高于对照组(P均 < 0.05);术后淋巴结转移数目明显少于对照组[(3.2±2.5)枚vs.(6.3±2.9)枚, P < 0.05];两组手术时间[(230.5±45.6)min vs.(205.6±42.4)min]及术中出血量[(425.5±115.4)mL vs.(210.6±125.6)mL]比较差异有统计学意义(P < 0.05);术后并发症发生率及淋巴结清扫数目两组差异均无统计学意义[(19.6±2.8)枚vs.(21.2±2.0)枚, P > 0.05]。观察组患者化疗耐受性良好, 不良反应主要为骨髓抑制、消化道反应。   结论   DOS方案作为进展期胃癌新辅助化疗方案有效率高, 患者耐受性和依从性好。围手术期安全性高, 可提高进展期胃癌患者的R0切除率、降低术后淋巴结转移率, 能提高近期生存率。
培美曲塞联合卡铂治疗非小细胞肺癌40例临床观察
朱斌, 苗晓慧
2013, 40(13): 792-795. doi: 10.3969/j.issn.1000-8179.2013.13.011
摘要:
  目的   培美曲塞(PEM)是一种多靶点抗叶酸化疗药, 目前已成为晚期非小细胞肺癌二线治疗的标准药物。本研究回顾分析培美曲塞联合铂类治疗非小细胞肺癌的临床疗效及不良反应。   方法   选择经病理学证实的非小细胞型肺癌患者40例, 予以培美曲塞二钠500 mg/m2静脉滴注, 联合卡铂常规剂量第1d、21d为1周期, 每例患者至少化疗2个周期(观察组), 并与吉西他滨(GEM)+卡铂方案做对照(对照组), 评价疗效及不良反应。   结果   治疗2个周期后PEM组有效率50%, GEM组有效率45%。主要为骨髓抑制及胃肠道反应, PEM组的骨髓抑制、胃肠道反应、AST、尿素氮及皮疹、脱发的发生率明显低于GEM组, 2组不良反应比较差异有统计学意义(P < 0.05)。   结论   培美曲塞二钠联合卡铂治疗非小细胞型肺癌临床疗效明显, 不良反应少。
术式交流
胸骨后甲状腺肿瘤的外科治疗
赵敬柱, 于洋, 李亦工, 李小龙, 魏松锋
2013, 40(13): 796-798. doi: 10.3969/j.issn.1000-8179.2013.13.012
摘要:
  目的   探讨胸骨后甲状腺肿瘤外科治疗的手术入路和围手术期处理方案。   方法   回顾分析天津医科大学附属肿瘤医院自2004年1月至2012年10月经手术治疗的104例胸骨后甲状腺肿瘤患者的临床资料。   结果   104例患者中, 102例通过颈部低位领式切口入路切除, 2例患者加用垂直胸骨劈开切口, 无手术死亡患者, 所有患者中结节性甲状腺肿52例, 甲状腺腺瘤41例, 甲状腺乳头状癌10例, 甲状腺滤泡癌1例。   结论   大多数胸骨后甲状腺肿瘤可经颈部低位领式切口入路切除, 加强术前影像学检查、娴熟的手术技巧、完善的术后管理可减少手术并发症。
临床病例讨论
1例原发睾丸淋巴瘤的临床特点与诊治分析
宋拯, 王华庆, 钱正子, 张会来, 翟琼莉, 姚欣, 肖建宇, 宋秀宇, 王佩国, 王亚非
2013, 40(13): 799-803. doi: 10.3969/j.issn.1000-8179.2013.13.013
摘要:
睾丸淋巴瘤发病率占睾丸肿瘤1%~9%, 全部非霍奇金淋巴瘤(NHL)的1%~2%。病理以弥漫大B细胞淋巴瘤最常见。临床主要表现为单侧睾丸无痛性肿大, 呈进行性加重, 有发热、盗汗、体重减轻的B症状者占25%~41%。局部阴囊部位多受累, 中枢神经系统复发常见。治疗多采用以R-CHOP联合预防性鞘注化疗及对侧睾丸放疗治疗为主的综合治疗模式, 可明显改善患者的无进展生存期及总生存期。现介绍天津医科大学附属肿瘤医院淋巴瘤科收治的1例睾丸原发的恶性淋巴瘤及其诊治的多学科综合讨论供大家参考。
综述
恶性肿瘤放疗诱发骨肉瘤的研究进展
周姝汇, 郑水儿, 姚阳
2013, 40(13): 804-806. doi: 10.3969/j.issn.1000-8179.2013.13.014
摘要:
随着恶性肿瘤放射治疗的广泛应用、肿瘤综合治疗效果不断提高, 肿瘤患者生存期延长, 放疗诱发的发生率极低的骨肉瘤发病率逐渐增高。放疗诱发的骨肉瘤(radiation-induced osteosarcoma, RIOS)与原发性骨肉瘤相比恶性程度更高、进展更快、预后更差, 严重影响了放疗后患者生存期。目前临床上对放疗诱发的骨肉瘤认识尚不全面, 本文结合国内外最新报道, 阐述恶性肿瘤放疗诱发的骨肉瘤的发病率、发生分子机制、潜伏期和诊断标准, 并与原发性骨肉瘤的临床特点、影像学表现、治疗预后进行比较归纳做一综述。
基于多基因表达水平的乳腺癌预后预测研究进展
李晓青, 冯玉梅
2013, 40(13): 807-810. doi: 10.3969/j.issn.1000-8179.2013.13.015
摘要:
乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一。依据目前的临床预后预测指标和诊疗规范, 70%淋巴结阴性和30%淋巴结阳性乳腺癌患者在术后5~10年内未发生远处转移, 但却遭受不必要的化疗副作用。基于高转移潜能的肿瘤细胞中一系列转移相关基因的表达异常, 多基因表达水平检测作为临床病理因素的补充已成功应用于乳腺癌患者预后预测。本文将对基于基因表达谱和RT-QPCR方法的多基因表达水平的乳腺癌患者预后预测方法和预测能力的研究进展进行综述。
乳腺癌微环境中巨噬细胞相关因子与环氧化酶-2的调节
陈伟贤, 赵建华, 唐金海
2013, 40(13): 811-814. doi: 10.3969/j.issn.1000-8179.2013.13.016
摘要:
肿瘤微环境中浸润的巨噬细胞(tumor-associated macrophages, TAMs)是近年来癌症治疗的新靶点。TAMs通过分泌大量促癌细胞因子如血管内皮生长因子、白细胞介素、基质金属蛋白酶等, 促进肿瘤细胞增殖、侵袭和转移。炎症因子环氧化酶-2(cyclooxygenase-2, COX-2)参与了微环境中血管形成和免疫调节, 加速肿瘤进程, 也是乳腺癌治疗的有力靶点。而COX-2抑制剂如塞来昔布, 在抑制TAMs活性和改善肿瘤微环境方面具有较大潜力。因此, 本文就乳腺癌微环境中TAMs分泌的重要细胞因子与COX-2的相互关系加以讨论, 分析其对应的拮抗剂单独或与COX-2抑制剂联合的使用价值, 旨在为选择多靶点联合阻断TAMs活性的研究提供理论基础, 也为乳腺癌的生物靶向治疗提供新方向。