2012年  第39卷  第2期

基础研究
miR-200a通过β-catenin/TCF-4信号通路抑制胃癌细胞系生长侵袭能力的体外研究
苏娟, 张庆瑜, 康春生, 张安玲, 王涛, 张洁
2012, 39(2): 65-69. doi: 10.3969/j.issn.1000-8179.2012.02.002
摘要:
  目的  研究miR-200a通过β-catenin/TCF-4信号通路对SGC7901胃癌细胞增殖活性及侵袭迁移能力的影响。  方法  化学合成miR-200a mimics, 采用脂质体Lipofectamine 2000转染胃腺癌细胞SGC7901, qRT-PCR检测转染效果, 细胞免疫荧光、Western blot检测转染后目的蛋白的表达, TOP/FOP荧光素酶检测β-catenin/TCF-4活性, Transwell、划痕实验检测细胞迁移侵袭能力、MTT法检测细胞的增殖活性, 流式细胞术检测细胞周期分布的改变。  结果  脂质体介导的miR-200amimics转染SGC7901后, β-catenin/TCF-4蛋白的表达均降低, β-catenin的表达出现了细胞核向胞浆的转移。TOP荧光素酶活性下降2.27倍, 而FOP荧光素酶活性基本不变。转染miR-200amimics组细胞的增殖活性、迁移、侵袭能力比空白组和阴性对照组明显下降, 细胞周期出现G0/G1期阻滞。  结论  提高miR-200a表达可以降低β-catenin/TCF-4信号通路的活性, 抑制SGC7901的生长侵袭迁移能力。
以pAAV为载体的RANi沉默E2F3对前列腺癌LNCAP细胞系的影响
陈涛, 胡海龙, 孙岩, 吴长利
2012, 39(2): 70-73. doi: 10.3969/j.issn.1000-8179.2012.02.003
摘要:
  目的  探讨以pAAV为载体的RANi沉默E2F3对前列腺癌LNCAP细胞系的影响及其作用机制。  方法  用pAAV-siE2F3穿梭质粒转染LNCAP细胞, 流式细胞计数检测转染后细胞凋亡, 细胞周期变化; Westernblot检测转染后E2F3蛋白与Bcl-2蛋白表达的变化, 分析E2F3蛋白与Bcl-2蛋白变化相关性。  结果  与对照组相比, pAAV-siE2F3穿梭质粒有效的沉默了E2F3蛋白表达(P < 0.01), pAAV-siE2F3穿梭质粒组细胞凋亡明显增加(P < 0.01), G1期细胞明显增加(P < 0.01), S期明显减少(P < 0.01), pAAV-siE2F3穿梭质粒组与对照组相比, Bcl-2蛋白表达明显减少(P < 0.01)。  结论  本实验初步明确了E2F3在前列腺癌细胞周期调控细胞凋亡方面起的作用, E2F3可能通过影响Bcl-2表达调控细胞凋亡; 为进一步阐明E2F3基因与前列腺癌的关系, 及以E2F3为靶点的前列腺癌基因治疗提供理论基础。
病例报告与分析
颌下腺脊索瘤并多发肺转移1例
赵向飞, 聂青
2012, 39(2): 73-73. doi: 10.3969/j.issn.1000-8179.2012.02.017
摘要:
临床研究
检测外周血Lunx mRNA表达在诊断非小细胞肺癌微转移中的临床价值
余辉, 黄秀英, 胡袆, 区伟, 朱志华, 王军业, 杨寒, 鹿彬, 张兰军, 王欣
2012, 39(2): 74-76, 84. doi: 10.3969/j.issn.1000-8179.2012.02.004
摘要:
  目的  探讨检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血Lunx mRNA表达对于诊断肿瘤微转移的临床价值。  方法  采用荧光定量RT-PCR技术分别对98例NSCLC患者和20例正常对照组外周血Lunx mRNA的表达进行检测分析。  结果  NSCLC组患者外周血Lunx mRNA的阳性率为74.5%, 显著高于对照组的15%(χ2=25.642, P < 0.05);Ⅲ期NSCLC患者的阳性率显著高于Ⅰ期和Ⅱ期患者的阳性率(χ2=21.014, P < 0.05);淋巴结转移阳性和阴性患者的外周血中CK19mRNA阳性率分别为93.2%和46.2%, 差异有统计学意义(χ2=27.372, P < 0.05);不同细胞分化程度与NSCLC患者外周血微转移阳性率有密切关系(χ2=30.004, P < 0.05);NSCLC患者外周血微转移与年龄、性别、吸烟史、原发肿瘤部位无密切关系(P>0.05)。  结论  Lunx mRNA的高表达可能与非小细胞肺癌的微转移有关, 可作为检测NSCLC患者微转移的分子标志物, 其有助于早期诊断肺癌转移, 指导临床分期和治疗。
胰腺癌组织中转化生长因子β诱导蛋白表达及临床意义
王玉亮, 郭仁德, 张彧
2012, 39(2): 77-79. doi: 10.3969/j.issn.1000-8179.2012.02.005
摘要:
  目的  探讨胰腺癌组织中转化生长因子β诱导蛋白(TGFBIp/βig-h3)mRNA和蛋白表达水平及其意义。  方法  收集15例胰腺癌术后的患者癌组织、癌旁组织以及4例正常胰腺组织标本, 提取胰腺组织标本总RNA, 利用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测胰腺组织标本TGFBIp mRNA水平; 应用Western blot检测TGFBIp蛋白表达水平。  结果  胰腺癌组织TGFBIpmRNA及蛋白表达水平明显高于癌旁胰腺组织及正常胰腺组织(P < 0.01)。在不同分化程度的胰腺癌组织中, TGFBIp mRNA及蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05);Ⅲ~Ⅳ期及有淋巴结转移胰腺癌组织中TGFBIp mRNA及蛋白表达水平明显高于Ⅰ~Ⅱ期及无淋巴结转移胰腺癌组织, 差异有统计学意义(P < 0.05)  结论  TGFBIp高表达与胰腺癌的发生发展相关, 其可能的调控机制及生物学效应有待进一步研究。
siRNA特异性沉默TPX2基因对人宫颈腺癌Hela细胞体外生长的影响
常海平, 田原, 王敬芝, 徐杰, 勾晓娟, 程建新
2012, 39(2): 80-84. doi: 10.3969/j.issn.1000-8179.2012.02.006
摘要:
  目的  应用TPX2-siRNA转染Hela细胞, 探讨TPX2基因沉默后对Hela细胞增殖和侵袭力及周期分布的影响。  方法  合成TPX2特异性的siRNA 4对, 随机siRNA阴性对照1对。Lipofectamine 2000介导siRNA转染Hela细胞株。RT-PCR检测转染前后mRNA表达的变化, Western blot检测转染前后蛋白表达的变化, MTT、流式细胞术(FCM)、Transwell小室和Matrigel基质侵袭实验观察细胞增殖、周期、及侵袭能力的变化。  结果  在600μL转染体积中, 在siRNA浓度为20μmoL/L时, siRNA和Lipoectamine2000以2.5:2比例搭配时, 转染效率最高, 24h为(98.33±1.53)%。TPX2mRNA沉默效果尤以TPX2-siRNA4最强达(82.5±0.43)%, 其蛋白表达水平明显降低, 抑制率达(63.4±1.05)%。TPX2-siRNA4转染组发生了明显的细胞周期S期停顿现象, 细胞增殖受到显著抑制。TPX2-siRNA4转染组穿膜细胞为13.33±1.53显著低于空白对照组54.33±2.52和阴性对照组53.00±4.00(P < 0.05)。  结论  siRNA干扰TPX2后能抑制Hela细胞增殖和侵袭, 影响其周期分布, 因此TPX2可以作为人宫颈腺癌基因治疗的候选靶点。
紧密连接相关蛋白在胃腺癌中的联合表达及预后意义
张真真, 张声, 陈余鹏, 陈林莺, 王行富, 王承党
2012, 39(2): 85-88. doi: 10.3969/j.issn.1000-8179.2012.02.007
摘要:
  目的  探讨紧密连接蛋白(Claudin-1、-3、-4和-7)在胃腺癌纵向侵袭转移中的表达变化及预后意义。  方法  应用组织芯片和免疫组化SP法检测139例胃腺癌患者黏膜腺上皮(含肠化生上皮), 黏膜层, 肿瘤中心, 侵袭前沿及淋巴结转移灶胃癌组织Claudin-1、-3、-4、-7的表达水平, 分析其与胃腺癌侵袭转移及预后关系。  结果  Claudin-1、-3、-4和-7在肠化生上皮的总体表达水平高于胃黏膜腺上皮(P < 0.05);从黏膜层→肿瘤中心→侵袭前沿→淋巴结转移灶, 胃癌组织Claudin-1、-3、-4和-7的表达呈抛物线样趋势, 肿瘤中心表达最高(χ2=111.84, 52.35, 33.71和111.91, P < 0.05);肿瘤中心Claudin-1和-3表达降低, 患者预后不良(χ2=5.530和χ2=9.846, P < 0.05), Cox多因素生存分析发现仅Claudin-3和临床分期可作为胃癌患者的预后独立预测因素。  结论  Claudin-1、-3、-4和-7在胃癌纵向侵袭转移中的表达变化可能与胃黏膜的肠上皮化生、肿瘤增殖及侵袭转移中的上皮-间质转化有关。
ATP7A在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义
李壮华, 邱妙珍, 骆卉妍, 吴雯静, 王志强, 徐瑞华
2012, 39(2): 89-92. doi: 10.3969/j.issn.1000-8179.2012.02.008
摘要:
  目的  探讨晚期非小细胞肺癌(NSCLC)组织中P型铜转运ATP酶(ATP7A)的表达与患者临床病理特征及预后的关系。  方法  采用免疫组织化学法检测89例未接受手术及放疗而只接受含顺铂方案一线化疗的晚期非小细胞肺癌组织中ATP7A的表达情况, 并分析ATP7A表达与患者临床病理特征及预后的关系。  结果  ATP7A的免疫阳性反应主要定位于非小细胞肺癌细胞的细胞质, ATP7A的标本阳性率为41.6%(37/89), 而在间质及正常肺组织均未见表达; ATP7A表达状态与含顺铂方案的化疗反应及组织分化分级呈正相关(P=0.001, P=0.039), 而与年龄(P=0.469)、性别(P=0.442)、分期(P=0.436)、PS(P=0.361)、组织学分型(P=0.670)及CEA水平(P=0.661)无关; Kaplan-Meier法生存分析显示ATP7A阳性表达的患者总生存(OS)低于ATP7A阴性表达患者(P=0.021);单因素分析显示ATP7A、分期、PS、CEA水平和组织分化分级和OS呈正相关(P值=0.021、P=0.019、P=0.004、P=0.022、P=0.010);多因素分析显示ATP7A、分期、CEA水平和组织分化分级是接受含铂方案化疗的晚期非小细胞肺癌患者OS的独立预后因子(P=0.045、P=0.001、P=0.003、P=0.009)。  结论  ATP7A在大部分晚期非小细胞肺癌组织中均有表达, ATP7A表达水平与晚期非小细胞肺癌的组织分化分级、含铂方案化疗疗效及患者生存期密切相关, 提示ATP7A与非小细胞肺癌的发生发展有关,可以作为含铂方案化疗的疗效预测因子及生存期的预后因子。
Wnt途径拮抗剂Dickkopf-3蛋白在肝细胞癌中表达亚细胞定位及临床意义
王宁, 杨斌, 骆莹, 王涛, 王凤梅, 高英堂, 杜智
2012, 39(2): 93-96, 104. doi: 10.3969/j.issn.1000-8179.2012.02.009
摘要:
  目的  分析Wnt途径拮抗剂Dickkopf-3(DKK3)蛋白在肝细胞癌中表达和亚细胞定位, 探讨其在肝细胞癌中的临床意义。  方法  采用细胞免疫荧光和免疫组织化学方法, 分析肝癌细胞系及43例肝细胞癌与相应癌旁组织中DKK3的蛋白表达, 并对其中31例中DKK3基因的甲基化状态进行检测。  结果  DKK3蛋白在肝细胞癌组织中的高表达率为67.4%(29/43), 显著高于相应癌旁组织中的41.8%(18/43)(P=0.017), 且细胞核内呈明显高表达; 肝细胞癌组织中DKK3基因甲基化发生率为90.3%(28/31), 显著高于相应的癌旁组织中的64.5%(20/31)(P=0.015), DKK3基因的甲基化状态与蛋白表达无明显相关性(P=0.844);DKK3低表达的肝细胞癌患者5年总生存率和无瘤生存率明显高于高表达者(P=0.049, P=0.001)。  结论  肝细胞癌中DKK3基因的甲基化状态可能与肝细胞癌中DKK3蛋白表达呈负相关; DKK3在癌组织中的高表达可能对肝细胞癌具有促进而非抑制性作用, 可以作为判断肝细胞癌预后的指标。
临床应用
肾癌术后辅助性免疫治疗临床疗效评价
郑建华, 杜君, 陈旭升, 杨庆, 张艳辉, 姚欣
2012, 39(2): 97-100. doi: 10.3969/j.issn.1000-8179.2012.02.010
摘要:
  目的  观察免疫治疗对肾癌术后患者远期复发及转移的预防作用, 分析免疫治疗对肾癌术后患者预后的影响。  方法  对2000年1月至2005年12月根治性肾切除术后病理诊断为肾细胞癌的298例病例进行回顾性研究, 术前影像学未见局部淋巴结及远处转移。分析患者临床特征及免疫治疗与无进展生存时间及总生存时间的关系。  结果  根活性肾切除术后接受IFNα-2a治疗的70例患者5年无进展生存率及总生存率分别为90.0%和91.4%;接受LAK细胞治疗的109例患者5年无进展生存率及总生存率分别为83.5%和89.9%;而术后未接受任何治疗的119例患者5年无进展生存率和5年总生存率分别为68.1%和76.5%, 有显著性差异。单因素分析免疫治疗为无进展生存时间和总生存时间影响因素; 多因素分析显示, 免疫治疗可作为肾癌独立的预后因素。  结论  根治性肾切除术后辅助性免疫治疗可以降低国内肾癌患者术后复发转移风险, 延长生存时间。
原发性肝癌的中医体质类型分布及其预后因素分析
龙顺钦, 杨小兵, 吴万垠, 邓宏, 河文峰, 周宇姝, 廖桂雅, 欧阳育树, 蔡姣芝, 胡学军
2012, 39(2): 101-104. doi: 10.3969/j.issn.1000-8179.2012.02.011
摘要:
  目的  探讨原发性肝癌的中医体质类型分布及其预后因素。  方法  采用标准化的中医体质分类量表, 对151例原发性肝癌患者进行中医体质辨识并分析中医体质类型等因素对肝癌预后的影响。  结果  患者的体质类型分布为: 平和质37例(24.5%), 气虚质36例(23.8%), 阳虚质25例(16.6%), 湿热质21例(13.9%), 气郁质14例(9.3%), 瘀血质10例(6.6%), 特禀质4例(2.6%), 阴虚质2例(1.3%), 痰湿质2例(1.3%)单因素及多因素分析结果提示体质类型为气虚质、临床分期、AFP水平和CLIP评分均是生存期的独立影响因素、其中气虚质是值得进一步研究的可能影响患者预后的独立危险因素。  结论  肝癌患者的偏颇体质主要以气虚质、阳虚质和湿热质三种体质为主。气虚质是影响原发性肝癌预后的强独立危险因素。
羟基喜树碱术后即刻灌注联合维持灌注预防非浸润性膀胱癌复发的长期疗效分析
田军, 李长岭, 马建辉, 肖振东, 寿建忠, 肖泽均, 王栋, 毕新刚, 管考鹏, 鲁力, 韩苏军, 石泓哲, 关有彦, 温力
2012, 39(2): 105-106, 109. doi: 10.3969/j.issn.1000-8179.2012.02.012
摘要:
  目的  总结大剂量羟基喜树碱即刻灌注联合维持灌注预防非肌层浸润性膀胱癌术后复发的疗效。  方法  回顾性分析了167例中、高危非肌层浸润性膀胱尿路上皮癌患者的临床资料.男性116例, 女性51例, 平均年龄51岁。所有患者均经病理诊断证实, 分期为Ta71例、T196例, 分级为G166例、G250例、G351例。患者行经尿道膀胱肿瘤电切术后即刻膀胱内灌注羟基喜树碱40mg, 保留20~30 min, 术后1w开始羟基喜树碱维持灌注, 40 mg/次, 1次/w×8次, 以后1次/月×10次, 每次维持2 h。  结果  155例患者获得随访, 平均随访期92(72~112)个月。患者1、2和5年肿瘤复发率分别为23.2%、31.6%和41.3%。治疗的长期预后因素包括肿瘤的分级、分期、数目和大小。本组中膀胱Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ度不良反应的发生率为13.5%、3.2%和1.9%, 未见Ⅳ度不良反应。全身不良反应仅见Ⅰ度不良反应, 发生率为1.3%。  结论  大剂量羟基喜树碱即刻灌注联合维持灌注预防膀胱癌术后复发的长期疗效较为满意, 不良反应发生率低, 患者多能良好耐受治疗。
白蛋白结合型紫杉醇治疗晚期恶性肿瘤的疗效与安全性研究
凌扬, 徐建忠, 杨全良, 盛桂凤, 周彤
2012, 39(2): 107-109. doi: 10.3969/j.issn.1000-8179.2012.02.013
摘要:
  目的  观察白蛋白结合型紫杉醇治疗晚期恶性肿瘤的疗效和安全性。  方法  25例晚期恶性肿瘤患者接受含白蛋白结合型紫杉醇方案(白蛋白结合型紫杉醇130 mg/m^2, 第1天、第8天)每21 d为1周期, 至少2个周期后评价疗效。  结果  25例患者中总有效率56%(14/25), 临床受益率76%(19/25), 中位TTP5.6(2.1~11.6)个月。不良反应主要为中性粒细胞减少(12%), 外周神经损害(8%)和肌肉酸痛乏力(12%)。  结论  白蛋白结合型紫杉醇方案治疗晚期恶性肿瘤疗效确切, 安全性良好。
彩色多普勒超声对卵巢肿瘤的诊断价值
张蕾
2012, 39(2): 110-113. doi: 10.3969/j.issn.1000-8179.2012.02.014
摘要:
  目的  探讨彩色多普勒超声检查在卵巢肿瘤中的临床诊断价值。  方法  选取2009年4月至2011年4月本院诊断为卵巢肿瘤患者114例, 所有患者均行彩色多普勒超声检查且资料完整, 均经手术和病理证实。  结果  114例卵巢肿瘤患者经手术后病理明确诊断为: 良性卵巢肿瘤83例, 恶性卵巢肿瘤31例, 多普勒超声检查诊断良性卵巢肿瘤76例, 恶性卵巢肿瘤27例, 诊断符合率为90.35%;良、恶性卵巢肿瘤内部血流信号测出比例相差9.21%, 经统计学软件处理, 其差异统计学有意义(P < 0.05);两组间R1、PI差异比较明显, P值均 < 0.05, 差异具有统计学意义; 两组间的PSV、HV、LV、MV、S/D值差异无统计学意义(P>0.05)。  结论  彩色多普勒超声检查对卵巢肿瘤良恶性的鉴别诊断具有重要的意义。
综述
以分子分型为基础的肺癌靶向治疗研究进展
蒋日成, 李凯
2012, 39(2): 114-117. doi: 10.3969/j.issn.1000-8179.2012.02.015
摘要:
随着基因分析技术的不断发展, 对肿瘤的发病机制以及治疗的研究愈加透彻。依靠传统的组织病理学分类无法充分实现对肿瘤患者的个体化治疗方案选择在制定临床研究的方案时, 研究者在考虑病理类型和临床因素之外, 还要充分考虑受试个体的基因特征。那么, 分子异常改变对肿瘤治疗意义如何, 以基因特征为基础的肿瘤临床试验时代离我们到底有多远?本文在此将可能影响肿瘤治疗方向的基因改变类型, 以及近年肺癌研究领域一系列基于分子特征的临床试验做一综述。